Activité insecticide et effet de biocontrôle du multi-nucléopolyhédrovirus Autogra pha californica (AcMNPV) sur les larves de Spodoptera frugiperda

Abstrait

La chenille légionnaire d'automne, Spodoptera frugiperda, est l'un des ravageurs les plus importants du maïs, qui a récemment envahi la Chine. Afin de déterminer l'effet de contrôle de Le nucléopolyhédrovirus multiple Autographa californica (AcMNPV) sur les larves de S.frugiperda, l'activité insecticide et l'effet de lutte biologique de l'AcMNPV sur S.frugiperda ont été étudiés et analysés par les méthodes de dosage biologique et de test d'efficacité sur le terrain. Les résultats ont montré que la concentration létale médiane (LC₅₀)de l’AcMNPV agissant sur le 2^sdle stade larvaire de S.Frugiperda était de 2,9x dix⁷PIB/mL. L’efficacité moyenne du contrôle de 10⁷PIB/mL AcMNPV+Bt suspension (1 500 mL/hm²) sur S.frugiperda était de 68,99% le 10^èmejour et 66,87% le 15^èmejour après l'administration. Enfin, le logiciel DNAMAN 6.0 a été utilisé pour identifier l'homologie de l'ADN des insectes morts, et les résultats ont montré que les séquences des gènes polh, lef-8 et lef-9 de l'insecte mort et du S．Frugiperda étaient de 100 % identique.Tous les résultats ci-dessus pourraient vérifier en outre que l'AcMNPV peut jouer un rôle clé dans le contrôle de S．frugiperda．Il est suggéré que 10⁷PIB/mL AcMNPV＋BT suspension (1500 ml/hm²)doit être appliqué au plus fort de l'apparition des jeunes larves de S.frugiperda, et après 16h00-17h00 par une journée ensoleillée pour éviter l'influence de la température et de la lumière élevées, afin que la préparation virale puisse mieux jouer rôle et améliorer son effet de contrôle sur S.frugiperda．

Mots clés : AcMNPV ;Spodoptera frugiperda;Lépidoptères nuisibles ;larvaire;bio-pesticide;AcMNPV＋Suspension Bt;activité insecticide;prévention et contrôle écologiques

Spodoptera frugiperda est un ravageur migrateur omnivore qui est entré pour la première fois en Chine depuis le Myanmar en 2019 et s'est rapidement propagé dans 1 518 districts de 26 provinces et municipalités de Chine, représentant une menace sérieuse pour la sécurité alimentaire de la Chine. Jusqu'à présent, dans la stratégie de contrôle de la chenille légionnaire, le contrôle de l'épidémie de chenille légionnaire dépend toujours de l'utilisation massive de pesticides chimiques.L’utilisation excessive de pesticides chimiques peut facilement entraîner une résistance des ravageurs, une réapparition des résidus et une pollution environnementale.Une série de problèmes graves ont sérieusement limité le développement durable de l'agriculture moderne. D'où le recours à des méthodes de lutte biologique ou à la substitution des biopesticides.L’utilisation de pesticides pour lutter contre la légionnaire devient de plus en plus importante et fait l’objet d’une attention croissante.

Autographa californica multiple nucléopolyhedrovirus AcMNPV est un virus de polyédrose nucléaire intégré à plusieurs grains isolé de la larve d'Argyria luzerne. Il peut infecter de manière croisée plus de 30 types de ravageurs lépidoptères tels que la teigne de la betterave, la teigne du chou, l'Argyria argyra et le Calyptera teristoides. Le type mixte avec Bt et d'autres insecticides et virus nuisibles non ciblés en tant que synergistes a un effet synergique évident sur de nombreux ravageurs Noctuidae, élargit encore le spectre insecticide et améliore l'effet insecticide.AcMNPV est un nouveau biopesticide contre les virus d'insectes développé par Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD.Il s'agit d'une combinaison du virus de la polyédrose nucléaire de la luzerne Argyria et d'un puissant synergiste du virus Bt.Avec une bonne activité insecticide, A a été largement appliqué dans les légumes, les arbres fruitiers, le riz et d'autres champs.Dans cet article, l'activité insecticide et l'effet de lutte biologique du nucléopolyhédrovirus multiple Autographa californica (AcMNPV) contre Spodoptera frugiperda ont été détectés et évalués par des tests d'activité en laboratoire et des expériences sur le terrain, afin de fournir un support de données pour une large application du virus de la polyédrose nucléaire dans la lutte biologique contre Spodoptera frugiperda dans le maïs.Il fournit une base théorique pour l'enregistrement et l'application de l'agent de suspension AcMNPV plus Bt dans le contrôle de la chenille légionnaire.

1.Matériels et méthodes

1.1Tester des virus et des agents biologiques

Le virus testé était le nucléopolyhédrovirus multiple Autographa californica (AcMNPV). Le 20 mai 2019, Spodoptera frugiperda a été collecté dans le champ de maïs de la ville de Xiantao, province du Hubei, et le test de dépistage de l'infection virale a été effectué dans le laboratoire de Wuhan Unioasis Biological Technology Co. , LTD.(Dans lequel le multiplenucléopolyhédrovirus Autographa Californica AcMNPV a une activité infectieuse élevée contre Spodoptera frugiperda), les larves de Spodoptera frugiperda ont été élevées pour augmenter et se propager. Les larves mortes infectées par le virus ont été broyées avec de l'eau, filtrées à travers 3 couches de gaze et le filtrat a été centrifugé à 600r/min et 300r/min. Le microcompte était de 1,8 × 10^dixpolyèdres virulents par mL (Polyhedralinclusionbody PIB), c'est-à-dire pour obtenir un virus de la polyédrose de qualité technique pure (1,8 x 10^dixPIB/mL), conservé à basse température et réservé.

L'agent biologique testé était la polyédrose nucléaire Autographa california.Bacillus thuringiensis pour abrégé AcNPV.Bt (1,0 × 107 PIB/mL).Il est développé par Wuhan Unioasis Bilogical Technology Co., LTD et produit par sa filiale Wuhan Chuqiang Biological Technology Co., LTD.

1.2Testez les insectes

L'insecte expérimental était Spodoptera frugiperda.Le 20 juillet 2019, des larves de Spodoptera frugiperda ont été collectées dans le champ de maïs d'été du village de Banqiao, ville de Dachangzhen, comté de Tongshan, province du Hubei, et ramenées au laboratoire de l'Institut de recherche sur la protection des plantes et les engrais de l'Académie d'agriculture du Hubei. Sciences. Des feuilles de maïs fraîches et tendres ont été nourries en une seule tête dans des boîtes de Pétri en plastique jetables (diamètre 8 cm, hauteur 3 cm).Les conditions d'alimentation intérieures étaient : (25 ± 1) ℃ et une humidité relative de 60 % à 70 %, la photopériode est de 16 L : 8D.Après plusieurs générations de reproduction, les blocs d’œufs frais et stérilisés sont conservés pour utilisation.

1.3Activité de laboratoire du nucléopolyhédrovirus multiple Autographa californica (AcMNPV) contre Spodoptera frugiperda

Six gradients de concentration, 1,0 × 10⁹, 1,0 ×10⁸, 1,0 ×10⁷, 1,0 ×10⁶, 1,0 ×10⁵, 1,0 ×10⁴ont été conçus dans cette expérience. Tout d’abord, le TC d’AcNPV a été dilué à 1,0 × 10⁹PIB/mL, puis dilué 10 fois pour obtenir d'autres diluants avec des concentrations différentes. L'expérience a été traitée avec un contrôle à blanc. Au total, 7 processus ont été effectués, chaque processus étant répété 3 fois.

La méthode d'alimentation par segments de feuilles a été adoptée, c'est-à-dire que les jeunes feuilles de maïs fraîches (longueur 2 cm × largeur 2 cm) ont d'abord été traitées avec un spray de suspension virale, puis les larves ont été nourries et les têtes individuelles ont été nourries dans des boîtes de Pétri.Les bandes d'alimentation étaient : température (25 ± 1) ℃, phase à humidité (60 % ~ 70 %), photopériode (16 L : 8D). Une fois les feuilles de maïs toxiques mangées, des feuilles de maïs fraîches non toxiques doivent être ajoutées. immédiatement.48 larves du deuxième stade de la chenille légionnaire ont été traitées à plusieurs reprises.Partie de référence 9{9-11}, Compte tenu des changements dans la prolifération du virus dans les cellules et les hôtes de la famille des papillons nocturnes, du nombre d'insectes morts dus au virus et le nombre total d'insectes morts a été étudié 7 et 10 jours après l'infection, le taux de mortalité a été calculé ainsi que la CL50.

1.4Test sur le terrain sur l'effet de contrôle de 10 millions de suspensions AcMNPV.Bt sur les larves de chenilles légionnaires

Le test d'efficacité sur le terrain a été réalisé dans le champ de maïs d'été du village de Xiaoyuan, ville de Chuangwang, comté de Tongshan, province du Hubei.La parcelle d'essai fait au total 1500 m^２, le type de sol est un sol calcique, le pH est de 6,8, la teneur en matière organique est de 13,9 % et la fertilité est moyenne à élevée. Le maïs est planté toute l'année et la variété de maïs est Xiyu n° 3. Le 13 juillet ,2020, 45% d'engrais composé 750kg//hm^２sera appliqué comme engrais de base et semé.Depuis 2019, une présence importante de chenille légionnaire d’automne a été observée dans ce champ.

Un total de 10 millions de suspensions AcMNPV.BT (1 500 ml/hm²) et 15 % de benzoate d'émamectine. Suspension d'indocarbe (300 ml/hm²), l'insecticide couramment utilisé et le contrôle à blanc ont été traités avec 3 traitements.Chaque traitement a été répété 4 fois, avec un total de 12 parcelles expérimentales, chacune couvrant une superficie de 100 m².²

Dans l'après-midi du 26 août 2020 (lorsque les larves de Spodoptera frugiperda sont fréquentes), pulvériser le pesticide une fois le soir.Le pulvérisateur électrique à dos multifonction de la marque Lebang 3WBJ-16DZ est utilisé, avec une pression de travail de 0,40 ~ 0,60 MPa, un diamètre d'orifice de 1 mm et un débit de 60 ~ 85 L/h.Le jour d'application des pesticides est ensoleillé, avec une température de 23-32 ℃.Réaliser des enquêtes les 1er, 3ème, 5ème, 7ème, 10ème et 15ème jours après l'application.Au cours de l'enquête, 10 points d'échantillonnage aléatoires ont été prélevés dans chaque parcelle et 10 plantes ont été étudiées en continu à chaque point, pour un total de 100 plantes.Le nombre d'insectes vivants, de décès, d'empoisonnements et d'ennemis naturels sur chaque plant de maïs a été enregistré.La formule de calcul pertinente est la suivante :

Taux de diminution des insectes = (nombre d'insectes vivants avant application - nombre d'insectes vivants après application)/nombre d'insectes vivants avant application

Effet de prévention et de contrôle = (Diminution du taux d'insectes dans la zone de traitement - Diminution du taux d'insectes dans la zone de contrôle)/(100 - Diminution du taux d'insectes dans la zone de contrôle)*100 %

1,5Identification moléculaire de l'ACMNPV

1) Testez des échantillons de virus.Sélectionnez la liqueur mère ACMNPV pour la détermination de l'activité intérieure (échantillon 1), la préparation biologique 10 millions d'ACMNPV.Bt SC (échantillon 2), les cadavres d'insectes infectés par le virus après les tests d'efficacité sur le terrain (échantillon 3) et les larves de chenille légionnaire de deuxième génération infectées par cadavres d'insectes collectés dans l'échantillon 3 (échantillon 4) comme échantillons de virus de test, pour vérifier si l'AcMNPV parmi les 10 millions d'ACMNPV.Bt a une activité bactéricide contre les larves de la légionnaire d'automne.

2) Extraction d'ADN.Prélevez 1,0 mL d’échantillon AcMNPV, ajoutez 99,0 mL d’eau distillée et faites osciller soigneusement pendant 1 minute.Prendre 300 μL de suspension après oscillation, ajouter 100 μL de solution de craquage alcaline, bain-marie à 37 ℃ pendant 30 minutes.Ajouter 200 µL de tampon Tris·HCl et centrifuger à 10 000 tr/min pendant 8 minutes.Prendre le surnageant dans un tube à centrifuger, ajouter 5 μL de Protease K et 60 μ L de SDS, bain-marie à 65 ℃ pendant 2 heures, retirer et laisser refroidir à température ambiante.Ajoutez bien 650μL de phénol saturé de Mix L Tris, centrifugez à 10 000 tr/min pendant 5 minutes et prélevez le surnageant dans un nouveau tube à centrifuger.Ajoutez 650 μL de liquide mélangé de phénol et de chloroforme (rapport de volume 1:1), centrifugez à 10 000 tr/min pendant 5 minutes, puis prenez le surnageant dans un nouveau tube à centrifuger.Ajouter 650 μL de liquide mélangé de chloroforme et d'alcool isoamylique (rapport volumique 24:1), centrifuger à 10 000 tr/min pendant 5 minutes, et enfin prélever le surnageant dans un nouveau tube à centrifuger.Mesurez la concentration d’ADN à l’aide d’un spectrophotomètre.

3) Amplification PCR.Utilisation du système standard T3 Super Mix : Échantillon d'ADN 2 μ L. 0,5 μL d'amorces pour avant et après, T3 Super Mix 18 μL et ddH₂O7μL.La condition d’amplification PCR est de 95 ℃.Après 3 minutes de pré-dénaturation, les cycles suivants sont effectués : 98 ℃ pendant 15 secondes, 52 ℃ pendant 20 secondes, 72 ℃ pendant 20 secondes et enfin 72 ℃ pendant 5 minutes, au total 42 fois le cycle.

4) Électrophorèse sur gel d’agarose ADN.Prendre le produit d'amplification PCR 2 μL et 5 kb de marqueur d'ADN et mettre dans du gel d'agarose et électrophorétique à 180 V pendant 20 min.Après électrophorèse, observez les produits PCR dans le système d’imagerie sur gel.

Introduction de Polh en amont :

AGGGTTTCCCAGTCCACGGGCTGAG-GATCCTTT

Amorce Polh en aval :

GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT

Amorce amont Lef-8 :

AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-GAC

Amorces aval Lef-8 :

GAGCGGATAATTTCACATTGTACGGATCTTTCGGC

Amorces en amont Lef-9

AGGGTTTCCCAGTCCACGAAACGGGTACGCGG

Amorces aval Lef-9 :

GAGCGGATAATTTCACATTGTCACCGTCAGTC

Enfin, appliquez le logiciel DNAMAN6.0 pour comparer les séquences polh, lef-8 et lef-9 mesurées.

1.6Analyse et traitement des données

Les données expérimentales ont été traitées à l'aide du logiciel d'analyse statistique de données IBM SPSS 22.0.

Dans l'expérience de détermination de l'activité insecticide du virus, le nombre d'insectes morts et vivants traités avec chaque concentration est compté, et le taux de mortalité et le pourcentage ajusté de morts sont calculés et convertis en valeurs de probabilité.La concentration de chaque traitement est convertie en valeurs lg.L'équation de régression de la virulence (pente ± SE) est calculée à l'aide de valeurs et de poids de probabilité de travail, et LC₅₀Valeur et sa limite de confiance à 95 %, et enfin effectuer le test du chi carré (²).Dans l'expérience sur l'effet de la lutte sur le terrain, le nombre d'insectes vivants dans chaque traitement a été compté et le taux de réduction des ravageurs a été calculé.L'effet de contrôle a été calculé à l'aide de la formule d'édition Microsoft Excel.La méthode de Duncan a été utilisée pour l'analyse, et une ANOVA unidirectionnelle a été utilisée pour comparer les différences significatives entre les traitements,

Les graphiques du texte ont tous été créés à l'aide du logiciel Microsoft Excel.

2.Résultats et analyse

2.1Activité insecticide de l'AcMNPV contre les larves de Spodoptera frugiperda

Les résultats des tests d'activité en intérieur (Tableau 1) montrent qu'après 7 jours de traitement, le LC₅₀de l'AcMNPV agit sur les larves du 2ème stade de Spodoptera frugiperda est de 4,1x10⁷PIB/mL et LC₉₀est de 1,05 x10⁸PIB/mL.Après 10 jours de traitement, le LC₅₀de l’AcMNPV agit sur les larves du 2ème stade est de 2,9x10⁷PIB/mL et LC₉₀est 7,8x10⁷PIB/mL.Le LC₅₀et LC₉₀de l'AcMNPV agit sur les larves du 2e stade de la légionnaire d'automne après 7 jours de traitement étaient tous deux supérieurs à 10 jours, ce qui indique que l'AcMNPV présentait une bonne activité insecticide contre les larves de Spodoptera frugiperda à 7 jours.

2.2 Effet de contrôle sur le terrain de l'AcMNPV.Bt agit sur les larves de Spodoptera frugiperda

Les résultats des essais d'efficacité sur le terrain ont montré que 10 millions d'AcMNPV.BtSC (1 500 mL/hm²) a eu un effet relativement lent sur les larves de spodoptera frugiperda.L'effet de contrôle moyen les 1er, 3ème et 5ème jours après la pulvérisation était respectivement de 11,57 %, 16,23 % et 15,56 %.L'effet de contrôle moyen au 7ème jour après la pulvérisation n'était que de 21,88 %.Cependant, le 10ème jour après la pulvérisation, l'effet de contrôle des insectes a soudainement augmenté à 68,99 %, et l'effet de contrôle moyen le 15ème jour après la pulvérisation était également de 66,87 %.Cependant, par rapport aux agents chimiques Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15 % (300 mL/hm²), il a eu un bon effet destructeur sur les larves de spodoptera frugiperda, ce qui peut rapidement réduire le nombre d'insectes.L'effet de contrôle moyen les 1er, 3e, 5e et 7e jours après le traitement était respectivement de 91,39 %, 92,66 %, 90,71 % et 87,19 %.Cependant, l'effet de contrôle moyen au 10e jour a commencé à diminuer, à seulement 67,63 %, et l'effet de contrôle moyen au 15e jour a diminué à 51,60 %.Voir le tableau 2 pour plus de détails.

Dans le même temps, nous avons également constaté que la diminution du taux d’insectes dans la zone témoin était négative les 1er, 3ème et 5ème jours après le traitement, indiquant une augmentation du nombre d’insectes.Le 7ème jour après le traitement, il a commencé à devenir positif (la population d'insectes a commencé à diminuer).Le taux moyen de diminution des insectes aux 10ème et 15ème jours était respectivement de 38,25% et 47,00%, ce qui est très probablement lié au fait que certaines larves de spodoptera frugiperda ont commencé à se nymphoser dans le sol et que les générations se sont superposées après 10-15 jours. .

En résumé, on constate que les 10 millions d'AcMNPV.BtSC (1 500 mL/hm²) a un certain effet de contrôle sur les spodoptera frugiperda, mais son effet est lent et son efficacité est d'environ 10 à 15 jours après l'application.

2.3 Effets de l'AcMNPV.Bt sur les ennemis naturels

Lors d'expérimentations sur le terrain, les effets de 10 millions d'AcMNPV.La suspension du Bt sur les ennemis naturels des ravageurs du maïs, tels que les araignées, les coccinelles et les coléoptères, a également été étudiée.Les résultats ont montré que 10 millions d’AcMNPV.La suspension Bt n’a pas causé de dommages significatifs aux ennemis naturels tels que les araignées, les coccinelles et les coléoptères, avec une moyenne de 13,4 ennemis naturels pour 100 plantes.Cependant, les agents chimiques Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% en suspension ont eu un effet toxique important sur les ennemis naturels tels que les araignées, les coccinelles et les coléoptères.Le premier jour après le traitement, le nombre moyen d'ennemis naturels sur 100 plants de maïs n'était que de 3,1, et le troisième jour après le traitement, seulement 5,2 ennemis naturels de divers types (Figure 1) ont été trouvés.On voit que les 10 millions d'AcMNPV.La suspension Bt a un bon effet protecteur sur les ennemis naturels des ravageurs, tandis que la suspension Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb à 15 % provoque des dégâts relativement plus importants sur les ennemis naturels.

2.4 Identification moléculaire de l’AcMNPV

Les résultats de l'amplification PCR de différents échantillons de test ont montré que les fragments d'amplification de polh, lef-8 et lef-9 des échantillons 1, 2, 3 et 4 étaient de taille cohérente et correcte.Les produits de PCR des gènes polh, lef-8 et lef-9 étaient respectivement de 0,54, 0,716 et 0,29 kb (Figure 2), ce qui prouve que l'AcMNPV a une activité insecticide contre les larves de spodoptera frugiperda.

Enfin, le logiciel DNAMAN 6.0 a été utilisé pour effectuer l'alignement de séquences sur les fragments amplifiés de polh, lef-8 et le.f-9 dans les échantillons 1, 2, 3 et 4 (Figure 3).Les résultats ont montré que la similarité entre les séquences amplifiées de polh, lef-8 et lef-9 dans les échantillons 1, 2, 3 et 4 était de 100 %, ce qui indique que les échantillons 1, 2, 3 et 4 proviennent tous du même virus AcMNPV.

3. Discussion

AcMNPV est un virus en forme de bâtonnet d'insecte qui infecte le corps des insectes en se nourrissant.Le virus prolifère et se propage dans tout le corps de l’insecte, infectant progressivement tout le corps et conduisant finalement à la mort.Les résultats de cette étude indiquent que l'AcMNPV a une bonne activité biologique contre les larves de Spodoptera frugiperda.Sa CL aux 7ème et 10ème jours était respectivement de 4,1x107 et 2,9x107PIB/m, et il a montré de bons effets de contrôle sur le terrain.La suspension mixte de 10 millions d'AcMNPV.Bt (1500 mL/hm²) a eu de bons effets de contrôle moyens les 10e et 15e jours après le traitement, atteignant respectivement 68,99 % et 66,87 %, et était sans danger pour les ennemis naturels.Par conséquent, le rythme de la recherche et du développement devrait être accéléré afin que l’AcMNPV puisse jouer un rôle plus important dans la lutte biologique contre Spodoptera frugiperda.La suspension de 10 millions d'AcMNPV.Bt produite par Wuhan Chuqiang Biotechnology Co., Ltd. est un composé d'AcMNPV et du biopesticide Bacillus thuringiensis (Bt), qui peut améliorer considérablement l'activité insecticide du virus.Le Bt étant un insecticide à large spectre doté d’une bonne activité insecticide microbienne, lorsque l’AcMNPV est associé au Bt, sa toxicité devrait être considérablement améliorée par rapport à une formulation unique.Cela élargit non seulement la gamme insecticide du Bt, mais améliore également sa toxicité, atteignant ainsi l’objectif d’utiliser une seule formulation pour lutter contre plusieurs ravageurs.C’est aussi la raison pour laquelle la suspension de 10 millions d’AcMNPV.Bt peut être largement encouragée dans les légumes, les arbres fruitiers et le riz.Par conséquent, 10 millions d’AcMNPV.Bt peuvent être promus comme agent de contrôle vert contre Spodoptera frugiperda dans le maïs.

Dans cette étude, lors de la réalisation de tests d'efficacité sur le terrain, en cas de déclin rapide de la population d'insectes dans la zone de contrôle (le taux de diminution des insectes au 15ème jour atteint 47,00 %), l'effet de contrôle moyen des 10 millions d'AcMNPV.Bt suspension (1500 ml/hm²) le 15ème jour après le traitement était de 66,87 %, montrant une tendance à la hausse rapide.Alors que l'effet de contrôle moyen du pesticide chimique méthoxazole à 15 % · indéfencarb SC (300 ml/hm²) le 15ème jour après le traitement a diminué à 51,60 %.Bien que l'on puisse constater que la suspension à 10 millions d'AcMNPV.Bt (1 500 mL/hm²) a un certain effet de contrôle sur Spodoptera frugiperda du 10ème au 15ème jour, compte tenu de la lente efficacité des pesticides biologiques et de la courte durée de vie et des générations superposées de larves de Spodoptera frugiperda, il est recommandé d'augmenter le nombre d'investigations et de prolonger la durée de l'investigation lorsque mener des essais d'efficacité sur le terrain de pesticides biologiques (en particulier de préparations virales), qui peuvent permettre d'obtenir des résultats expérimentaux plus idéaux.C’est également une limite de cette étude.En résumé, comparés aux agents biologiques, les agents chimiques ont un effet destructeur relativement plus élevé sur les ravageurs et agissent rapidement.Ils peuvent être utilisés comme mesure d’urgence de prévention et de contrôle lors d’infestations de ravageurs.Lorsque les dommages causés par les ravageurs sont relativement légers, les pesticides biologiques peuvent remplacer les pesticides chimiques comme l'une des mesures vertes de prévention et de contrôle, réduisant ainsi la pollution de l'environnement et obtenant l'effet de protection de l'écologie agricole.

De plus, le gène Polh (polyédrine) utilisé dans cette étude est un type de promoteur protéique polyédrique. Lui et P10 sont le promoteur le plus couramment utilisé dans le système de vecteurs d'expression des baculovirus (BEVS), tous deux fortement exprimés à un stade avancé. d'une infection virale^[13].Cependant, l'activité du promoteur p10 est inférieure à celle du promoteur polh, c'est pourquoi le promoteur polh est souvent utilisé pour l'expression de protéines exogènes.Le gène lef-8 peut coder pour la plus grande sous-unité de l'ARN polymérase du virus et constitue un type de facteur d'expression tardive.^[14].lef-9 est un type de facteur d'expression tardive qui code pour la sous-unité complexe protéique avec lef-4, lef-8 et p47 dans les baculovirus.La recherche a montré que les virus dépourvus du gène lef-9 ne peuvent pas générer de particules virales ayant une activité infectieuse, tandis que les virus dotés du gène lef-9 peuvent restaurer l'activité infectieuse du virus en la restaurant.Par conséquent, le gène lef-9 est un gène essentiel pour que le baculovirus forme un BV (Budded Virus) avec une activité infectieuse.^[15].On peut voir que les gènes lef-8 et lef-9 présentent un conservatisme élevé dans différents types de virus de la polyédrose nucléaire, de sorte que les gènes lef-8 et lef-9 peuvent être utilisés comme base pour identifier les types de virus.Par conséquent, cette étude a utilisé polh, lef-8 et lef-9 comme objets de détection, et grâce à l'alignement des séquences génétiques, l'homologie était élevée, atteignant toutes 100 %.La méthode de détection moléculaire rapide a une fois de plus vérifié que l'AcMNPV possède une bonne activité insecticide contre Spodoptera frugiperda, ce qui convient à une promotion et une application ultérieures dans la prévention et le contrôle de Spodoptera frugiperda.

Depuis 2019, le Spodoptera frugiperda a envahi la Chine et est devenu un ravageur important du maïs.Il a formé une population sédentaire dans certaines régions du sud et du sud-ouest de la Chine, causant d'énormes pertes à l'industrie chinoise du maïs et menaçant sérieusement la sécurité alimentaire du pays.^[16].Face à la grave situation actuelle de prévention et de contrôle de Spodoptera frugiperda en Chine, il est urgent d'accélérer le dépistage et le développement de pesticides efficaces pour la prévention et le contrôle de Spodoptera frugiperda.^[17].Bien que les insecticides viraux aient limité leur application à grande échelle en raison de leur vitesse d'action lente et de leur spectre insecticide étroit, dans le contexte d'une attention croissante portée à l'écologie et à la protection de l'environnement, les insecticides baculovirus devraient être de plus en plus largement utilisés dans la production agricole en raison de leurs avantages significatifs par rapport aux insecticides viraux. pesticides traditionnels.En raison de la sensibilité des préparations de virus d’insectes aux conditions extérieures telles que les températures élevées, la lumière du soleil, la pluie et l’âge des ravageurs[18].Par conséquent, il est recommandé d’appliquer des pesticides pendant la période de pointe d’apparition des larves de ravageurs.Il est préférable de l'utiliser après 16h00-17h00 les jours ensoleillés pour éviter l'impact de conditions environnementales défavorables telles qu'une température et une lumière élevées, afin que la formulation virale puisse mieux jouer son rôle et améliorer l'effet de contrôle sur les ravageurs. .