Acquisition de matières premières virales

Criblage des régimes artificiels en intérieur

Sur la base des habitudes alimentaires d'Helicoverpa armigera, 3 à 5 formulations de régimes artificiels sont sélectionnées. Après optimisation, la formulation favorisant un élevage continu et une capacité de ponte élevée est sélectionnée pour la production.

Élevage en intérieur d'Helicoverpa armigera

Les vers de la capsule du cotonnier capturés dans la nature sont domestiqués via un régime alimentaire de substitution progressif : alimentation végétale pure → alimentation végétale et artificielle mélangée → alimentation artificielle complète, afin d'établir une souche de laboratoire pour l'élevage de masse.

Inoculation virale

Lorsqu'environ 80 % des larves atteignent le 3ème stade, les graines virales purifiées (exemptes de bactéries diverses) sont diluées dans une suspension virale avec une concentration de 1,0×10⁴ à 1,0×10⁷ PIB/mL, qui est mélangée au régime alimentaire pour l'alimentation des larves.

Collection de larves mortes malades

L'observation commence 3 jours après l'alimentation du régime contaminé par le virus. Les larves mortes et moribondes au corps gonflé et à l'abdomen rougeâtre sont collectées deux fois par jour (matin et soir) jusqu'à ce que la collecte soit terminée.

Extraction et conservation du virus

Une quantité appropriée d’eau désionisée est ajoutée aux cadavres de larves et le mélange est broyé en bouillie à l’aide d’un homogénéisateur multifonctionnel. Le broyage est terminé une fois que la taille des particules répond aux spécifications.

Détection et comptage

L'identification et le comptage quantitatif sont effectués respectivement à l'aide d'un microscope électronique et d'un microscope optique. Le sous-emballage est effectué après avoir passé le contrôle.

Stockage des virus

Les suspensions virales qualifiées sont versées dans des fûts en plastique scellés et stockées dans un entrepôt frigorifique entre -10 ℃ et -20 ℃ pour une utilisation ultérieure.